马德里竞技球员名单 www.ocbqsw.com.cn 糖(sugar)在濃硫酸作用下,可經脫水反應生成糠醛或羥甲基糠醛,生成的糠醛或羥甲基糠醛可與蒽酮反應生成藍綠色糠醛衍生物,在一定范圍內,顏色的深淺與糖的含量成正比,故可用于糖的定量測定。該法幾乎可以測定所有的碳水化合物,不但可以測定戊糖與己糖含量,而且可以測所有寡糖類和多糖類,其中包括淀粉、纖維素等(因為反應液中的濃硫酸可以把多糖水解成單糖而發生反應),所以用蒽酮法測出的碳水化合物含量,實際上是溶液中全部可溶性碳水化合物總量。糖類與蒽酮反應生成的有色物質在 λ 620 nm處有最大吸收峰,故在此波長下進行比色。

1 試劑

1100 μg/ml葡萄糖標準溶液

2)蒽酮試劑

2 實驗方法

        2.1 標準曲線的繪制

6支具塞試管置于冰水中,按下表加入各試劑,迅速混合均勻后,在沸水浴中煮沸10 min,立即取出置于冰水中冷卻。以0號試管為空白對照,在 λ 620 nm下測定吸光度。以葡萄糖含量為橫坐標,以吸光度為縱坐標繪制標準曲線。


2.2 樣品前處理

稱取0.2 g樣品置于預冷的研缽中,分三次加入6 ml2 ml、2 ml、2 ml)預冷的蒸餾水,在冰浴上研磨成勻漿,轉入具塞試管中,再加入9 ml蒸餾水,在沸水浴中煮沸20 min,取出置于冰水中冷卻,過濾并定容至25 ml,即為糖提取液。

        2.3 測定方法

吸取1 ml提取液(用蒸餾水適當稀釋后)放入具塞試管中并置于冰水里,然后加入5 ml蒽酮試劑,迅速混合均勻后,在沸水浴中煮沸10 min,立即取出置于冰水中冷卻。以0號試管為空白對照,在 λ 620 nm下測定吸光度,通過標準曲線方程查得可溶性糖含量。

        2.4 計算公式

其中:

可溶性糖含量以百分數表示(%);

C為查標準曲線值(μg);

Vt為提取液總體積(ml);

Vs為測定時提取液用量(稀釋前)(ml);

W為樣品鮮重(g)。